721分光光度計是一種經(jīng)典且廣泛應(yīng)用的可見光分光光度計,在化學(xué)分析領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。它通過對物質(zhì)在特定波長下吸光度的測量,實現(xiàn)對物質(zhì)含量的定量分析以及物質(zhì)結(jié)構(gòu)的定性研究。 一、儀器預(yù)熱與檢查
在使用之前,先要進行儀器預(yù)熱。接通電源后,打開儀器開關(guān),讓儀器預(yù)熱,使儀器各部件達到穩(wěn)定的工作狀態(tài)。同時,檢查儀器的外觀是否完好,比色皿架是否清潔,波長調(diào)節(jié)旋鈕是否靈活,以及吸光度顯示是否正常等。
1、波長選擇
根據(jù)待測物質(zhì)的吸收特性,選擇合適的測量波長。通??梢酝ㄟ^查閱相關(guān)資料或進行預(yù)實驗來確定較佳波長。在721分光光度計上,通過旋轉(zhuǎn)波長調(diào)節(jié)旋鈕來設(shè)置所需的波長值。
2、比色皿的準備與校準
比色皿是分光光度計中用于盛放樣品溶液的重要部件。在使用前,需要選擇與儀器配套的比色皿,并確保其清潔、透明且無劃痕。為了消除比色皿之間的差異對測量結(jié)果的影響,需要進行比色皿的校準。通常采用空白溶液分別裝入各個比色皿中,在選定的波長下測量其吸光度,然后調(diào)整儀器的零點,使吸光度為零。接著,依次測量各個比色皿的吸光度,記錄下偏差值,在后續(xù)測量中根據(jù)偏差值對測量結(jié)果進行修正。
3、標準曲線的繪制
為了實現(xiàn)對未知樣品的定量分析,需要先繪制標準曲線。
配制一系列不同濃度的標準溶液,濃度范圍應(yīng)涵蓋待測樣品的可能濃度范圍。
將標準溶液依次倒入比色皿中,放入分光光度計的樣品池中進行測量,記錄下每個標準溶液在選定波長下的吸光度值。以標準溶液的濃度為橫坐標,吸光度值為縱坐標,繪制標準曲線。通過線性回歸分析,得到標準曲線的方程和相關(guān)系數(shù)。
二、未知樣品的測定
在完成標準曲線的繪制后,即可對未知樣品進行測定。將未知樣品處理成溶液形式,倒入比色皿中,按照與標準溶液相同的測量條件進行測量,得到未知樣品的吸光度值。將吸光度值代入標準曲線方程中,即可計算出未知樣品中待測物質(zhì)的含量。
三、注意事項
在使用光度計進行化學(xué)分析時,還需要注意一些事項。
1、要保證實驗環(huán)境的穩(wěn)定性,避免外界因素對測量結(jié)果的影響。
2、要注意儀器的清潔和維護,定期清洗比色皿和儀器內(nèi)部,防止雜質(zhì)和污垢對測量結(jié)果產(chǎn)生干擾。
3、在測量過程中要嚴格控制實驗條件的一致性,以確保測量結(jié)果的準確性和可靠性。
使用721分光光度計進行化學(xué)分析需要嚴格按照操作規(guī)程進行,從儀器預(yù)熱、波長選擇到標準曲線繪制和樣品測定,每一個環(huán)節(jié)都至關(guān)重要。